外来文库测序服务专为已完成样品前处理并自行构建好文库的客户提供。通过使用最先进的高通量测序技术,能够在短时间内生成高质量的测序数据,确保研究项目能够及时获得可靠的结果。
产品优势
适配多种类型的文库,并且其他平台的文库也可以经过转化DNBSEQ平台上进行测序,同时保证原始的文库序列不发生改变。
避免错误累计,DNBSEQ平台基于滚环扩增(Rolling Circle Amplification, RCA)的线性扩增技术,能够大大提高测序的准确性。
DUP率低,独特的测序策略来提高数据质量和减少重复序列(DUP)的发生率
InDel检测更灵敏,基于RCA的线性扩增技术能够降低插入和缺失测序的错误率
无Index hopping担忧,DNBSEQ平台测序的众多拷贝来源于一个模板,所以由Index hopping带来的错误不会累积
测序平台经验丰富,文章发表数量共计9,000+篇,涉及物种丰富的物种类型和不同专业领域
技术原理
华大科技测序仪采用先进的DNBSEQ核心技术,通过仪器气液系统先将DNA纳米球 (DNA nanoball, DNB) 泵入到规则阵列载片 (Patterned Array) 并加以固定,然后再将测序模板及测序试剂泵入。泵入后的测序模板与载片上的DNB的接头互补杂交,在DNA聚合酶的催化下,测序模板与测序试剂中的带荧光标记的探针相结合。接下来,通过激发荧光基团发光,不同荧光基团所发射的光信号被仪器相机采集,经过处理后可转换成数字信号,传输到计算机进行再次处理,最终获取待测样本的碱基序列信息。
图1 DNBSEQ测序流程图
所有跟DNB相关的测序技术都属于DNBSEQ。DNBSEQ测序技术主要包括: DNA单链环化和DNB制备 (Make DNB),规则阵列 (Patterned Array),DNB加载 (LoadDNB),cPAS (combinatorial Probe Anchor Synthesis,联合探针锚定聚合测序法),双端测序技术 (Pair-end),以及配套的流体和光学检测技术、碱基识别 (Basecall) 算法等。
与其他测序技术相比,DNBSEQ测序技术具有滚环复制扩增带来的错误累积低和规则阵列载片带来的信号密度高等原理性优势,大幅提高了测序准确性;而且,基于DNBSEQ测序平台的产出数据重复序列率低 (Dup率低)、有效数据利用率高、标签跳跃(Index Hopping)少,能有效降低“张冠李戴”的情况。此外,结合PCR free等建库方法,DNBSEQ测序平台拥有更好的SNP和InDel准确性。
技术参数
表格1 测序平台及对应产量
参数 | DNBSEQ-G99 | MGISEQ-2000 | DNBSEQ-T7 | DNBSEQ-T7+ | DNBSEQ-T10 | DNBSEQ-T20 |
产量* reads/lane | 80M(FCL) 200M(FCU) | 400M | 5800M | 12,000M | 32B | 40B |
读长 | PE300 | PE50/SE50/PE150/PE100 | PE150/PE100 | PE150 | PE150 | PE150 |
通量 | 中通量 | 中通量 | 高通量 | 高通量 | 超高通量 | 超高通量 |
Q30 | >90% | |||||
* 参考产量仅供参考。实际执行过程中,根据不同的文库类型和文库质量产量可能会有较大幅度的波动。
项目流程