T/B细胞是适应性免疫系统的两大细胞群，细胞表面受体TCR/BCR存在一块区域叫互补决定区（Complementary Determining Region, CDR），包含CDR1、CDR2、CDR3，其中CDR3最高变，在抗原识别中起关键作用。华大的免疫组库测序是通过多重PCR和高通量测序技术，分析编码CDR3区的DNA/RNA序列，获得机体的免疫特征。
图1 免疫组库图解
产品优势
一站式服务：提供从CDR3的扩增、建库、测序、后续信息分析以及数据挖掘一系列全方位的服务；
有针对性的研究方法：针对CDR3的V区及J区两端设计引物，目的扩增CDR3区域；
扩增偏好性低：采用两步法建库，并优化引物配比，将扩增偏好性降低约70%；
可重复性高：同一样本建库两次克隆一致性高；
图2 同一样本实验重复性评估(Hiseq)
更丰富的分析结果：新增多种结果统计图表；新增V/J基因频率分布统计、多样品聚类分析、共性分析、差异分析；新增四种多样性评估指标；
更友好的xbio结题报告展现形式：全新升级的结题报告界面友好，对分析方法及结果解释详尽，图表按照发表文章要求展示，让您一目了然；
更真实的克隆定量信息：将低质量reads与高质量克隆进行比对，挽回重要数据，让克隆定量信息不丢失；
更强的纠错能力和错配处理能力：利用多层聚类方法，纠正PCR和测序引入的错误；错配处理能力提升，更适合分析BCR的高突变区域。
产品应用
服务内容
目的链 | 目标区域 | 样品类型 | 扩增方法 | 测序策略 |
TCRα 或 TCRβ | CDR3 | DNA 或 RNA | M-PCR (VJ) | PE150 |
BCRH 或 BCRL | CDR3 | DNA 或 RNA | M-PCR (VJ) | PE150 |
BCRH (鉴定抗体亚型) | CDR3 | RNA | M-PCR (VC) | PE150 |
信息分析内容
1、基本数据统计
数据过滤，对原始数据进行去除接头污染及低质量reads的处理
数据搭建，数据拼接，消除测序背景及有效数据构建
数据统计，数据产出统计及测序数据的成分和质量评估
2、数据比对分析
比对分析，与数据库V/D/J基因片段比对
比对结果统计
3、克隆序列特征注释
CDR3区核酸序列和氨基酸序列
鉴定无效序列（包含终止密码子，超出结构范围）
鉴定单碱基突变（替换、删除、插入）（for BCR）
4、单样品克隆群体特征分析
CDR3序列长度分布
V/J基因频率分布
V-J基因组合频率分布（3D, Circos）
克隆群体结构分析（频率分布，D50曲线，甜甜圈图）
5、样品间比较分析
测序饱和度分析
克隆多样性分析(辛普森系数、香农威纳系数等)
样品间共有克隆分析
聚类分析（层次聚类，MDS聚类）
组间差异分析
